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纳豆激酶分析方法的研究

纳豆激酶的活性测定方法的研究是所有纳豆纤溶活性研究的基础,对纳豆企业的生产具有指导意义。目前被业内广泛使用的纳豆激酶测定方法有以下三种。

纳豆激酶溶纤活力测定方法(FU测定方法)

纳豆激酶FU的测定方法就是利用凝血酶将纤维蛋白原活化形成交联纤维蛋白,制成人工血栓,再添加纳豆激酶样品进行人工血栓分解,以紫外分光光度计测定所生成的分解产物的吸光度变化,计算出纤维蛋白溶解酶活性的方法。该方法酶活定义为:1分钟内纤维蛋白经分解而使反应体系吸光度增加0.01单位为1个溶纤活性,即为1 FU。

琼脂糖-纤维平板法(IUU测定方法)

琼脂糖-纤维蛋白平板法是目前最常用的纤溶酶溶栓活力的测定方法,也是最早用于纳豆激酶溶栓活力的测定方法之一。纤维蛋白平板法也是目前国家卫生部测定尿激酶及蚓激酶等溶栓酶活性的标准方法。

琼脂糖-纤维蛋白平板法的原理是用琼脂糖作为固体支持,以凝血酶和纤维蛋白原作用后制成人工血栓平板,取纳豆激酶样品点于平板上,恒温孵育一段时间后,用溶解圈垂直直径的乘积来表示纤溶活力。通常使用该方法以尿激酶(Urokinase,UK)或蚓激酶(Lumbrokinase,LK)作为对照标准品,NK的活性单位换算成相当于标准品的单位数(定义为IU或者U)。

中国食品发酵工业研究院“纳豆技术与分析中心”对上述方法进行了深入探索,并对几种测定方法之间的相互联系开展了初步研究,建立了一套成熟、稳定的检测体系。(冯雷)