克罗诺杆菌属（Cronobacter sp. ）是婴儿配方食品和特殊医学用途婴儿配方食品致病菌限量指标，采用GB 4789.40标准方法进行检测。新版 GB 4789.40-2024《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌检验》已正式颁布，将于今年8月8日正式实施。该标准中明确规定可使用具有菌种保藏资质单位提供的特定编号质控菌株或等效菌株进行质量控制。

与现行标准相比，主要变动如下：

增加了普通PCR方法作为选作项目

删除了挑选黄色菌落要求和产黄色素及苦杏仁苷项目

修改了培养基和试剂pH调节方法、生化反应温度和氨基酸培养基制备等技术内容

CICC对该标准中推荐的菌株特性进行验证并开发相应质控样品，满足检测实验室新标准转版需求，确保日常检测工作中的结果有效性。

表1 标准菌株/质控样品推荐列表

标准菌株典型特性

1. 前增菌

缓冲蛋白胨水(BPW) ，36 ℃培养18 h。

CICC 10305 大肠埃希氏菌：培养液浑浊。

CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌：培养液浑浊。

2. 选择性增菌

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)， 41.5℃培养24 h。

CICC 10305 大肠埃希氏菌：培养液浑浊。

CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌：培养液浑浊。

3. 分离

克罗诺杆菌显色培养基，36 ℃培养24 h。

CICC 10305 大肠埃希氏菌：菌落无色。

CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌：菌落呈蓝绿色。

注：M：Marker；1：CICC 21645 阪崎克罗诺杆菌；2：CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌；3: CICC 10305 大肠埃希氏菌；4：空白。

阳性对照CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌：出现预期大小(282 bp) 扩增条带，满足质控要求。

阴性对照CICC 10305 大肠埃希氏菌：未出现扩增条带，满足质控要求。

5. 确证实验

氧化酶试验

CICC 10305 大肠埃希氏菌：阴性，不变色。

CICC 10295 阪崎克罗诺杆菌：阴性，不变色。

CICC 25016 铜绿假单胞菌：阳性，蓝紫色。

中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）多年来积极推动标准菌株/标准样品研发与行业应用，中心现有标准菌株200余株，23株CICC标准菌株进入世界微生物数据中心（WDCM）推荐列表，60余株进入食品安全等相关领域国家标准，标准样品生产能力通过ISO 17034体系认可，达到国际领先水平。